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Lipo3000細(xì)胞轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)

細(xì)胞轉(zhuǎn)染常用的轉(zhuǎn)染試劑很多，其中，Lipo3000深受廣大科研工作者的喜愛(ài)，那我們來(lái)看看Lipo3000細(xì)胞轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)吧！一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備Lipofectamine™3000轉(zhuǎn)染試劑（ThermoFisher）、Opti-MEM（可以用無(wú)血清的培養(yǎng)基代替）二、實(shí)驗(yàn)步驟1.接種細(xì)胞，使其在轉(zhuǎn)染時(shí)達(dá)到70–90%匯合度。注：對(duì)于HEK293，6孔板一般鋪50萬(wàn)個(gè)細(xì)胞左右。對(duì)于PC9,24孔板一般鋪5-10萬(wàn)個(gè)細(xì)胞。由于不同細(xì)胞，生長(zhǎng)狀況不太一樣，需要根據(jù)情...

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影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的因素有哪些？

隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，細(xì)胞轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。常用于研究基因功能、基因表達(dá)調(diào)控、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中，其應(yīng)用非常廣泛。既然細(xì)胞轉(zhuǎn)染如此重要，那影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的因素有哪些？讓我們一起來(lái)看看吧！一、轉(zhuǎn)染試劑不同細(xì)胞系轉(zhuǎn)染效率通常不同，因此在轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前需要根據(jù)細(xì)胞特性選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑。可以通過(guò)已發(fā)表文獻(xiàn)和轉(zhuǎn)染試劑提供的已成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株來(lái)進(jìn)行選擇。二、細(xì)胞狀態(tài)轉(zhuǎn)染前細(xì)胞活力和總體健康狀況是轉(zhuǎn)染產(chǎn)生變異性的重要來(lái)源。一般建...

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細(xì)胞轉(zhuǎn)染常見(jiàn)方法之原理、特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)步驟

隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，細(xì)胞轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。常用于研究基因功能、基因表達(dá)調(diào)控、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中，其應(yīng)用非常廣泛。目前實(shí)驗(yàn)室最為常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法有兩種：脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法和電穿孔法，接下去分別介紹這兩種方法的原理、特點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)步驟。一、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法1.原理陽(yáng)離子脂質(zhì)體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過(guò)靜電作用，將DNA分子包裹入內(nèi)，形成DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物，也能被表面帶負(fù)電的細(xì)胞膜吸附，再通過(guò)融合或細(xì)胞內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞（見(jiàn)下...

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Aeonian Biotech抗體好嗎？

AeonianBiotech，一家荷蘭的生物技術(shù)公司，以抗體的研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售和服務(wù)為主營(yíng)業(yè)務(wù)。AeonianBiotech主營(yíng)產(chǎn)品為抗體，AeonianBiotech抗體好嗎？市場(chǎng)接受度如何呢？AeonianBiotech的特色主要是：重組兔和重組小鼠抗體、小鼠單克隆抗體和多克隆磷酸特異性兔抗體等，重組抗體由參與與靶蛋白特異性結(jié)合的可變區(qū)的DNA序列定義。抗體不再由傳統(tǒng)的雜交瘤產(chǎn)生，而是在轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系中瞬時(shí)或穩(wěn)定表達(dá)。隨著時(shí)間的推移，這種抗體的特性和性能不會(huì)因雜交瘤中常見(jiàn)的...

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Ichorbio抗體介紹

Ichorbio，總部位于英國(guó)牛津，多年來(lái)專(zhuān)注于體內(nèi)抗體的研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售。Ichorbio的目標(biāo)是成為研究級(jí)生物仿制藥和體內(nèi)抗體的最大供應(yīng)商，價(jià)格合理，助力您的研究路途更遠(yuǎn)前景更大。Ichorbio抗體主要有體內(nèi)抗體、同型對(duì)照抗體、科研用生物仿制藥抗體、RMP1-14、Fc沉默抗體等。ichorbio提供的抗體包括兩種系列：低內(nèi)毒素（Lowendotoxin）和超低內(nèi)毒素（Ultra-lowendotoxin），可以滿(mǎn)足或超過(guò)ren何研究機(jī)構(gòu)體內(nèi)工作所需的嚴(yán)格要求和嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)...

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